与老年性痴呆相关的载脂蛋白E基因型检测

 
  INNO-LiPA ApoE  
 
一、临床背景
 
 

载脂蛋白E(ApoE)是一种多态性蛋白,它可调节三磷酸甘油脂代谢,在脂蛋白中有其独特性。ApoE不仅可作为动脉粥样硬化高危指标,也可作为老年性痴呆(AD)检测指标之一。
    载脂蛋白E等位基因,位于人类第19号染色体上,编码3个纯合子(表型为E2/2,E3/3,
E4/4),3个杂合子(表型为E3/2,E4/3,E4/2)。
    在普通人群中,载脂蛋白E主要有三类同工型(ApoE2,ApoE3,ApoE4),其出现比率分别为8%,79%,13%,且这一比率在不同人群中差异很小。

 
 
二、临床意义
 
 

    研究表明,ApoE4/4在正常人群及老年性痴呆(AD)患者中出现频率具有明显差异:在60周岁散发AD患者中,ApoE4/4出现频率高达37%(24—52%);而在同一年龄对照组中,ApoE4/4出现频率只有13%(5-19%)。另外,ApoE2同工型可降低患AD的危险性,并可推迟发病年龄。因此,可将ApoE基因型作为预测及诊断AD的重要检测指标之一。

 
 
三、检测方法及原理
 
 

    INNO-LiPA ApoE基于反向探针杂交原理。经扩增后,被生物素标记的DNA与平行固定在薄膜检测条上的寡核苷酸探针进行杂交。杂交后,加入的标记有碱性磷酸酯酶的链霉抗生物素蛋白(链亲和素),与杂交产物上标记的生物素结合。加入显色底物NBT/BCIP孵育后,显现紫色或棕色,从而判断结果。
    对ApoE DNA片段的扩增,应使用INNO-LiPA ApoE Amplification扩增试剂盒。

 
 
四、检测特点
 
 

1、操作简便,快速检测;
2、高准确性,高特异性;
3、通过对比卡,可用肉眼直
   接判定结果。


 

 
 
五、步骤及时间
 
 
主要步骤 检测时间

扩增DNA
反向杂交
冲洗
显色反应

120分钟
30分钟
10分钟
60分钟

 
  ※扩增后总检测时间不超过2.5小时。  
     
     
     
     
 

Beijing Pason Pharmaceuticals Inc.
2004